Xidhmada DNA -da ee Genomic Blood

A1

A-2 Liisaska oo aan ku filnayn — Shaybaarada si fiican looguma qaso bakhaarka lysis-ka. Waxaa lagu talinayaa in si fiican loo qaso garaaca wadnaha-1-2 jeer. —Lysis unugyada oo aan ku filnayn oo ay sababtay hoos u dhaca hawsha borotiinase K. —Lysis unugyada oo aan ku filnayn ama hoos u dhaca borotiinka sababtuna tahay wakhtiga qubayska diiran oo aan ku filnayn. Waxaa lagu talinayaa in la gooyo cadka qaybo yaryar oo la kordhiyo wakhtiga qubayska si looga saaro dhammaan inta ku hadhay lysate -ka.

A-3 Xayeysiin DNA oo aan ku filnayn. —Ma jirto ethanol ama boqolkiiba hoose halkii 100% ethanol lagu dari lahaa ka hor inta lysate-ka loo wareejinin tiirka wareegga.

A-4 Qiimaha pH ee keydinta xaraashka ayaa aad u hooseeya. -U hagaaji pH inta u dhaxaysa 8.0-8.3.

Ethanol -ka hadhay ee ugu sarreeya.

—Waxaa jira kaydka maydhashada haraaga PW ee ugu sarreeya. Ethanol-ka waxaa lagu saari karaa iyada oo la dhexdhigo tiirka wareegga ee 3-5 daqiiqo, kadibna la dhigo heerkulka qolka ama 50 ℃ incubator 1-2 min.

A-1 Muunaddu ma aha mid cusub. —Soo saar DNA tijaabo ah oo togan si kontorool ah si loo go'aamiyo in DNA -da sambalku hoos u dhacay.

A-2 Daaweyn hore oo aan habboonayn. —Waxay sababtay qulqulka dareeraha nitrogen ee xad -dhaafka ah, soo celinta qoyaanka, ama qaddar aad u badan oo saamiga ah.

Saamaynta hore waa inay ku kala duwanaadaan shaybaarka kala duwan. Muunadaha dhirta, hubso inaad si fiican u shiiddo dareeraha nitrogen. Muunadaha xayawaanka, isku -darka ama si fiican ugu shiid nitrogen dareere ah. Shaybaarrada leh derbiyo unug oo ay adag tahay in la jebiyo, sida bakteeriyada G+ iyo khamiirka, waxaa lagu talinayaa in la isticmaalo lysozyme, lyticase ama habab farsamo si loo jebiyo derbiyada unugga.

4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit waxay qaadataa hab ku salaysan tiirka oo u baahan chloroform si loo soo saaro. Waxay si gaar ah ugu habboon tahay shaybaarrada dhirta ee kala duwan, iyo waliba budada qallalan ee dhirta. Xidhmada Dhirta ee Hi-DNAsecure sidoo kale waxay ku salaysan tahay tiirka, laakiin uma baahna soo saaridda phenol/chloroform, taasoo ka dhigaysa mid badbaado leh oo aan sun ahayn. Waxay ku habboon tahay dhirta leh polysaccharides sare iyo maaddada polyphenol. 4992709/4992710 DNAquick Plant System wuxuu qaataa hab dareere ku salaysan. Soo saaridda Phenol/chloroform sidoo kale looma baahna. Nidaamka daahirintu waa mid fudud oo degdeg ah oo aan lahayn xad u leh xaddiga bilowga muunadda, sidaa darteed adeegsadayaashu waxay u hagaajin karaan xaddiga si dabacsan iyadoo loo eegayo shuruudaha tijaabada. Cabbirka weyn ee jajabka gDNA waxaa lagu heli karaa dhalid sare.

DNA -ga hidde -wadaha waxaa laga soo saaray mugga kala duwan ee shay -baarka dhiigga oo dhan ee TIANamp DNA Kit. Natiijooyinka waa sida soo socota. Natiijooyinka waxay ku qoran yihiin tixraac kaliya, natiijooyinka soo -saaridda dhabta ah waxay ku xiran tahay xaaladaha muunadaha.

Soo -saaridda DNA -da xinjirowga dhiigga ayaa la samayn karaa iyadoo la adeegsanayo reagents -ka lagu bixiyay labadan xirmooyin iyadoo si fudud loogu beddelo hab -maamuuska tilmaamaha gaarka ah ee soo -saaridda xinjirta dhiigga ee DNA. Nuqulka jilicsan ee borotokoolka soo -saarka DNA -ga ee xinjirowga dhiigga ayaa la bixin karaa marka la codsado.

Ku jooji muunadda cusub 1 ml PBS, cusbada caadiga ah ama kaydka TE. Si dhammaystiran u samayso saamiga homogenizer oo soo ururi durdurka xagga hoose ee tuubada adigoo ku shubanaya. Ku tuur dusha sare, oo dib u soo celi roobka 200 μl buffer GA. Nadiifinta DNA ee soo socota ayaa la samayn karaa iyadoo la raacayo tilmaamaha.

Si loo nadiifiyo gDNA ee ku jirta plasma, serum iyo shaybaarka dareeraha jirka, TIANamp Micro DNA Kit ayaa lagula talinayaa. Si looga nadiifiyo fayraska gDNA shaybaarka serum/plasma, TIANamp Virus DNA/RNA Kit ayaa lagula talinayaa. Si looga nadiifiyo bakteeriyada gDNA shaybaarka serum iyo plasma, TIANamp Bacteria DNA Kit ayaa lagula talinayaa (lysozyme waa in lagu daraa bakteeriyada togan). Muunadaha candhuufta, Hi-Swab DNA Kit iyo TIANamp Bacteria DNA Kit ayaa lagula talinayaa.

Xidhmada Dhirta ee aan sugnayn ee DNA ama Nidaamka Dhirta DNAquick ayaa lagula talinayaa soo saaridda hidde -sidaha fangaska. Soo-saaridda hidda-wadaha khamiirka, Xirmadda DNA-da ee TIANamp ayaa lagula talinayaa (lyticase waa inay is-diyaarsataa).