Urity Daahirsanaanta sare: xuubka silica wuxuu ka takhalusaa wasakhda badankeeda.
Use Isticmaal ballaaran: Ku habboon dhiigga xinjirowga lidka ku ah (EDTA, heparin iwm), jaakad bufi ah iyo xinjiro dhiig.
Operation Qaliin degdeg ah: DNA -ga hidde -sidaha waxaa la heli karaa 1 saac gudahood.
Nooca: Tiirka Spin ku salaysan
Muunad iyo mugga bilowga: 100-1000 μl dhiig dhan oo ka yimid naasley, 5-20 μl dhiig dhan oo ka yimid shimbir ama amphibian, 200-1000 μl xinjiro dhiig
Bartilmaameed: DNA -ga hidde -wadaha.
Soo-saarka: 3-40 μg
Waqtiga hawlgalka: ~ 1 saac
Codsiyada hoose: Xaddididda dheef -shiidka enzyme, falanqaynta PCR, Qulqulka Koonfureed, isku -darka qoryaha, dhismaha maktabadda NGS, iwm.
1. Si meesha looga saaro hadhaaga RNA, xalka RNase A (100 mg/ml) wuxuu u baahan yahay inuu iskiis isu diyaariyo.
2. Badeecadan ayaa loo diiwaangeliyey fasalka I in vitroreagent -ka ogaanshaha ee FDA FDA. Fadlan la xiriir TIANGEN haddii loo baahdo macluumaad dheeraad ah.
Dhammaan alaabooyinka waxaa loo habeyn karaa ODM/OEM. Faahfaahinta,fadlan guji Adeegga La -habeeyey (ODM/OEM)
DNA -ga hidde -wadaha ayaa laga soo saaray shay -baarka dhiigga iyadoo la adeegsanayo TIANamp DNA Kit Kit. M: TIANGEN Sumade D15000. Muunado: 200 μl dhiigga xinjirowga lidka ku ah EDTA, EDTA/NaF, heparin iyo citrate sodium; jaakad bufi ah oo ka timid 2 ml dhiig; 10 μl dhiig digaag iyo 200 μl dhiig jiir. Wixii jaakad buluug ah, 2 μl oo ah 100 elul sarre ayaa la raray; kuwa kale, 4 μl oo ah 100 elul sarreeyaal ayaa lagu raray haad kasta. Natiijooyinka tijaabada ah: Xirmadda DNA-da Dhiigga ee TIANamp ayaa si ballaaran loogu adeegsan karaa nadiifinta DNA-ta oo tayo sare leh oo ka timaada dawooyinka xinjirowga lidka ku ah ee leh daawooyin kala duwan iyo sidoo kale dhiigga noocyada kala duwan. |
|
Isbarbar dhigga hidde -sidaha hidde -wadaha ee laga soo saaray 200 μl xinjirowga dadka oo leh EDTA iyadoo la adeegsanayo TIANamp Dhiigga DNA Kit iyo alaabo la mid ah oo ka yimid alaab -qeybiyeyaasha kale. M: TIANGEN Sumade D15000. 4 μl oo ah 100 elul sarre ayaa la raray haad kasta. Natiijooyinka tijaabada ah: Marka la barbardhigo alaab -qeybiyeyaasha kale, Xirmadda DNA -da Dhiiga ee TIANamp waxay heli kartaa dhalidda dhiigga gDNA ee sarreeya. |
A1
A-2 Liisaska oo aan ku filnayn — Shaybaarada si fiican looguma qaso bakhaarka lysis-ka. Waxaa lagu talinayaa in si fiican loo qaso garaaca wadnaha-1-2 jeer. —Lysis unugyada oo aan ku filnayn oo ay sababtay hoos u dhaca hawsha borotiinase K. —Lysis unugyada oo aan ku filnayn ama hoos u dhaca borotiinka sababtuna tahay wakhtiga qubayska diiran oo aan ku filnayn. Waxaa lagu talinayaa in la gooyo cadka qaybo yaryar oo la kordhiyo wakhtiga qubayska si looga saaro dhammaan inta ku hadhay lysate -ka.
A-3 Xayeysiin DNA oo aan ku filnayn. —Ma jirto ethanol ama boqolkiiba hoose halkii 100% ethanol lagu dari lahaa ka hor inta lysate-ka loo wareejinin tiirka wareegga.
A-4 Qiimaha pH ee keydinta xaraashka ayaa aad u hooseeya. -U hagaaji pH inta u dhaxaysa 8.0-8.3.
Ethanol -ka hadhay ee ugu sarreeya.
—Waxaa jira kaydka maydhashada haraaga PW ee ugu sarreeya. Ethanol-ka waxaa lagu saari karaa iyada oo la dhexdhigo tiirka wareegga ee 3-5 daqiiqo, kadibna la dhigo heerkulka qolka ama 50 ℃ incubator 1-2 min.
A-1 Muunaddu ma aha mid cusub. —Soo saar DNA tijaabo ah oo togan si kontorool ah si loo go'aamiyo in DNA -da sambalku hoos u dhacay.
A-2 Daaweyn hore oo aan habboonayn. —Waxay sababtay qulqulka dareeraha nitrogen ee xad -dhaafka ah, soo celinta qoyaanka, ama qaddar aad u badan oo saamiga ah.
Saamaynta hore waa inay ku kala duwanaadaan shaybaarka kala duwan. Muunadaha dhirta, hubso inaad si fiican u shiiddo dareeraha nitrogen. Muunadaha xayawaanka, isku -darka ama si fiican ugu shiid nitrogen dareere ah. Shaybaarrada leh derbiyo unug oo ay adag tahay in la jebiyo, sida bakteeriyada G+ iyo khamiirka, waxaa lagu talinayaa in la isticmaalo lysozyme, lyticase ama habab farsamo si loo jebiyo derbiyada unugga.
4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit waxay qaadataa hab ku salaysan tiirka oo u baahan chloroform si loo soo saaro. Waxay si gaar ah ugu habboon tahay shaybaarrada dhirta ee kala duwan, iyo waliba budada qallalan ee dhirta. Xidhmada Dhirta ee Hi-DNAsecure sidoo kale waxay ku salaysan tahay tiirka, laakiin uma baahna soo saaridda phenol/chloroform, taasoo ka dhigaysa mid badbaado leh oo aan sun ahayn. Waxay ku habboon tahay dhirta leh polysaccharides sare iyo maaddada polyphenol. 4992709/4992710 DNAquick Plant System wuxuu qaataa hab dareere ku salaysan. Soo saaridda Phenol/chloroform sidoo kale looma baahna. Nidaamka daahirintu waa mid fudud oo degdeg ah oo aan lahayn xad u leh xaddiga bilowga muunadda, sidaa darteed adeegsadayaashu waxay u hagaajin karaan xaddiga si dabacsan iyadoo loo eegayo shuruudaha tijaabada. Cabbirka weyn ee jajabka gDNA waxaa lagu heli karaa dhalid sare.
Soo -saaridda DNA -da xinjirowga dhiigga ayaa la samayn karaa iyadoo la adeegsanayo reagents -ka lagu bixiyay labadan xirmooyin iyadoo si fudud loogu beddelo hab -maamuuska tilmaamaha gaarka ah ee soo -saaridda xinjirta dhiigga ee DNA. Nuqulka jilicsan ee borotokoolka soo -saarka DNA -ga ee xinjirowga dhiigga ayaa la bixin karaa marka la codsado.
Ku jooji muunadda cusub 1 ml PBS, cusbada caadiga ah ama kaydka TE. Si dhammaystiran u samayso saamiga homogenizer oo soo ururi durdurka xagga hoose ee tuubada adigoo ku shubanaya. Ku tuur dusha sare, oo dib u soo celi roobka 200 μl buffer GA. Nadiifinta DNA ee soo socota ayaa la samayn karaa iyadoo la raacayo tilmaamaha.
Si loo nadiifiyo gDNA ee ku jirta plasma, serum iyo shaybaarka dareeraha jirka, TIANamp Micro DNA Kit ayaa lagula talinayaa. Si looga nadiifiyo fayraska gDNA shaybaarka serum/plasma, TIANamp Virus DNA/RNA Kit ayaa lagula talinayaa. Si looga nadiifiyo bakteeriyada gDNA shaybaarka serum iyo plasma, TIANamp Bacteria DNA Kit ayaa lagula talinayaa (lysozyme waa in lagu daraa bakteeriyada togan). Muunadaha candhuufta, Hi-Swab DNA Kit iyo TIANamp Bacteria DNA Kit ayaa lagula talinayaa.
Xidhmada Dhirta ee aan sugnayn ee DNA ama Nidaamka Dhirta DNAquick ayaa lagula talinayaa soo saaridda hidde -sidaha fangaska. Soo-saaridda hidda-wadaha khamiirka, Xirmadda DNA-da ee TIANamp ayaa lagula talinayaa (lyticase waa inay is-diyaarsataa).
Tan iyo markii la aasaasay, warshaddeennu waxay horumarinaysay alaabada heerka koowaad ee adduunka iyadoo la raacayo mabda'a
tayo leh marka hore. Alaabooyinkayagu waxay sumcad fiican ka heleen warshadaha iyo aaminaad qiimo leh oo ka dhexaysa macaamiisha cusub iyo kuwii horeba ..