Qalabka RNAprep ee Qalabka Cufan/Bakteeriyada
Astaamaha
Bu Kaydadka iyo hab -raacayaasha la hagaajiyay ee unugyada dhaqanka iyo shaybaarka bakteeriyadu waxay ka dhigaan geedi socodka mid sahlan oo habboon.
Ase DNase I ee gaarka ah wuxuu yareeyaa faddaraynta hidde -wadaha DNA.
Um Tiirrada Filtration-ka ee RNase-ka-gaarka ah CS waxay baabi'isaa wasakhaynta kale.
Urity Daahirsanaanta sare oo diyaar u ah in la isticmaalo RNA waxay ku habboon tahay codsiyada hoose ee xasaasiga ah.
■ Ma jirto wax soo saaridda phenol/chloroform, ma jirto LiCl iyo roobka ethanol, looma baahna CsCl centrifugation gradient centrifugation, taas oo ka dhigaysa geedi socodka mid nabdoon oo la isku haleyn karo.
Codsiyada
■ RT-PCR.
B Waqooyiga Blot, Dot Blot.
PC PCR-waqtiga dhabta ah.
Analysis Falanqaynta Chip.
Ing Baaritaanka PolyA, tarjumaadda fiitamiinka, Falanqaynta ilaalinta RNase iyo xirmidda molikalikada.
Dhammaan alaabooyinka waxaa loo habeyn karaa ODM/OEM. Faahfaahinta,fadlan guji Adeegga La -habeeyey (ODM/OEM)
 |
Qalab: Unugyada Jurkat ee Aadanaha (1 × 106 ) Habka: Wadarta RNA ee Unugyada Jukat -ka Aadanaha ayaa la go'doomiyey iyadoo la adeegsanayo RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit. Natiijooyinka: Fadlan fiiri sawirka korontada jel agarose jel. 2-4 μl of 50 elul eluates ayaa lagu raray layn kasta. Qalabka korontada ayaa lagu sameeyay 6 V/cm muddo 30 daqiiqo ah 1% jel agarose ah. |
 |
Qalab: TOP10 E.coli (1 × 108) Habka: Wadarta RNA ee TOP10 E.coli ayaa la go'doomiyey iyadoo la adeegsanayo RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit. Natiijooyinka: Fadlan fiiri sawirka korontada jel agarose jel. 2-4 μl of 50 elul eluates ayaa lagu raray layn kasta. Qalabka korontada ayaa lagu sameeyay 6 V/cm muddo 30 daqiiqo ah 1% jel agarose ah. |
A-1 Lysis cell ama homogenization kuma filna
---- Yaree isticmaalka muunadda, kordhi xaddiga kaydinta lysis, kordhiso isugeynta iyo waqtiga lysis.
A-2 Tirada muunaddu aad bay u badan tahay
---- Yaree cadadka muunada la isticmaalay ama la kordhiyo tirada kaydinta lysis.
A-1 Lysis unug oo aan ku filnayn ama isugeyn
---- Yaree isticmaalka muunadda, kordhi xaddiga kaydinta lysis, kordhiso isugeynta iyo waqtiga lysis.
A-2 Tirada muunaddu aad bay u badan tahay
---- Fadlan tixraac awoodda wax-qabadka ugu badan.
A-3 RNA gebi ahaanba lagama soo qaadin tiirka
---- Kadib markaad ku darto biyaha RNase-Free, ka tag dhowr daqiiqo ka hor intaadan ku shubin.
A-4 Ethanol ee ugu sarreeya
---- Ka dib markii aad biyo raacisay, mar kale centrifuge ka saar bakhaarka dhaqidda intii suurtogal ah.
A-5 Dhaqanka dhexdhexaadka ah gebi ahaanba lagama saaro
---- Markaad uruurinayso unugyo, fadlan hubso inaad ka saarto dhexdhexaadinta dhaqanka intii suurtogal ah.
A-6 Unugyada lagu kaydiyo RNAstore si fiican looma darin
---- Cufnaanta RNAstore-ku waxay ka weyn tahay celceliska dhaqanka unugyada; sidaas darteed waa in la kordhiyaa ciidanka dhexe. Waxaa lagu talinayaa in centrifuge at 3000x g.
A-7 Wax yar oo RNA ka kooban iyo tiro badan oo muunadda ah
---- Isticmaal muunad togan si aad u go'aamiso in dhalidda hooseysa ay keentay sambalku.
A-1 Maaddadu ma aha mid cusub
---- Unugyada cusub waa in lagu kaydiyo nitrogen dareere ah isla markiiba ama isla markiiba lagu rido reagent RNAstore si loo hubiyo saamaynta soo saaridda.
A-2 Tirada muunaddu aad bay u badan tahay
---- Yaree cadadka saamiga.
A-3 RNase wasakhaysann
---- Inkastoo kaydka ku jira xirmada uusan ku jirin RNase, way fududahay in la sumoobo RNase inta lagu jiro habka soo saaridda waana in si taxaddar leh loo maareeyaa.
A-4 Nadiifinta Electrophoresis
---- Beddel keydka korontada oo hubso in alaabta wax-cunaysa iyo Kaydinta Loading ay ka madax bannaan yihiin faddaraynta RNase.
A-5 Rarid aad u badan oo loogu talagalay electrophoresis
---- Hoos u dhig xaddiga rarista muunadda, ceel kasta rarantiisu waa inaysan dhaafin 2 μg.
A-1 Tirada muunaddu aad bay u badan tahay
---- Yaree cadadka saamiga.
B
-U samee daaweynta DNase-ka-dhaafka ah ee DNase xalka RNA ee la helay, RNA-na waxaa si toos ah loogu adeegsan karaa tijaabooyinka xiga daaweynta kadib, ama waxaa lagu sii nadiifin karaa xirmooyinka is-nadiifinta RNA.
Muraayadaha dhalooyinka, waxaa lagu dubay 150 ° C 4 h. Weelasha balaastigga ah, oo lagu dhex milay 0.5 M NaOH muddo 10 daqiiqo ah, ka dibna si fiican loogu maydhay biyo aan RNase lahayn ka dibna jeermis si looga saaro RNase. Soo -saarayaasha ama xalka loo adeegsaday tijaabada, gaar ahaan biyaha, waa inay ka madax bannaan yihiin RNase. U isticmaal biyo aan RNase lahayn dhammaan diyaarinta reagent (ku dar biyo dhalo galaas nadiif ah, ku dar DEPC xaddiga ugu dambeeya ee 0.1% (V/V), rux habeen iyo autoclave).
Qaybaha alaabta
MAXAA NAGU DOORTAY
Tan iyo markii la aasaasay, warshaddeennu waxay horumarinaysay alaabada heerka koowaad ee adduunka iyadoo la raacayo mabda'a
tayo leh marka hore. Alaabooyinkayagu waxay sumcad fiican ka heleen warshadaha iyo aaminaad qiimo leh oo ka dhexaysa macaamiisha cusub iyo kuwii horeba ..
- Tel: +86 010-59822688
- Dhismaha 5, No. 86, Shuangying West Road, Changping District, Beijing.
- people@tiangen.com
